技术成果一种新型乙型病毒性肝炎疫苗增效

本项目利用乙肝病毒表面抗原(HBsAg)从人肝脏cDNA噬菌体表达库的上百万个克隆中筛选到的一种乙肝病毒表面抗原结合蛋白(HBsAgbindingprotein,SBP),与HBsAg具有高度的亲和力。该分子在短短的10天左右时间产生效价接近的高滴度抗体(而常规要近一个月才能达这个水平),进一步用SBP与其他蛋白抗原(如BSA)结合实验显示也有相当的免疫增强效应,可使BSA免疫抗体效价升倍以上,产生高达10万以上的高滴度抗体,而抗原的用量只要原来的1/20(仅需2ug),用这么微小的剂量如不加增效剂几乎无抗体产生,但加了该增效剂后不仅使抗体效价大大提高,更有意义的事其快速反应特性,提示该分子可能被开发成一广谱的高效快速的蛋白类免疫增效剂。实验人员还用了较大剂量注射动物(相当于有效剂量的0倍),仍未产生任何可见的副反应,表明该分子作为免疫增效剂使用具有良好的安全性,具有高效、微量、快速反应、无毒等一般疫苗佐剂所无法比拟的优点。

目前SBP已经申请国家发明专利(申请号:200624756.5);同时,该增效剂已申请国际PCT专利(国际申请号:PCT/CN/),包括美国、日本、印度等国。

1.通过swissmodel在线预测并优化的SBP蛋白三维结构图

2.通过生物信息学的方法,运用3D-DOCK软件模拟了乙肝病毒表面抗原小S蛋白质与SBP互作模型(如图)

图乙肝病毒表面抗原S蛋白(红色)与SBP(蓝色)结合模型

3.现已对5个常见抗原进行了ELISA亲和筛选,结果发现SBP与水痘病毒、轮状病毒、乙肝表面抗原蛋白有极强亲和力,亲和常数KaL/mol。

4.SBP与乙肝疫苗、狂犬疫苗、水痘病毒等共同免疫,与不加SBP组比较,小鼠抗体效价在短时间内以更快速率上升,在同样的20天时间内实验组产生的抗原特异性抗体为对照组的将近5倍,加强免疫之后达到相同效价所需时间显著少于不加SBP组。进一步在猕猴免疫实验中发现该分子可以大大加强乙肝疫苗抗体形成的滴度,加快疫苗的免疫应答速度,可使动物在免疫10天左右抗体效价达到以上的水平。

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